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首页 > 拜谱生物 > 干货分享 > DIA核蛋白组学探求:绞股蓝皂苷GP5按照启用自噬更有效调节炭疽菌

DIA蛋白组学揭示:绞股蓝皂苷GP5通过激活自噬有效控制炭疽菌

发布时间:2024-12-03
炭疽病由炭疽菌属引发,是全.球最急迫的作物病虫害最为,拥有强危害性、数据分布广、妇科感染区域大等特质。化学上的消毒吡唑醚菌酯仍是现今防治法炭疽病的大部分方法手段,但误用造成的病源体抗药效、室内环境弄脏和食品类健康很安全等难题。作物是纯天然抗真菌感染物品的宝库,发展作物源消毒吡唑醚菌酯拥有会可选择性强、对非的目标生物学取决于健康很安全、健康等强势。

2024年11月烟台先进材料与绿色制造山东省实验室杨军丽探究员专业团体在Postharvest Biology and Technology杂志上发表题为“Gypenoside GP5 effectively controls Colletotrichum gloeosporioides, an anthracnose fungus, by activating autophagy”文章。研究利用DIA蛋白质组学技术,揭示了绞股蓝皂苷GP5通过激活自噬机制有效控制炭疽菌的机理,为防治炭疽病提供了新的思路。拜谱生物为该研究提供了DIA淀粉酶组学新技术服务。

英文版标题格式:绞股蓝皂苷GP5通过激活自噬有效控制炭疽病真菌Colletotrichum gloeosporioides

刊物:Postharvest Biology and Technology

202四年不良影响系数:6.4

刊登時间:2024年11月

客服组织:烟台先进材料与绿色制造山东省实验室

理论研究原材料:绞股蓝皂苷GP5处理后的炭疽病真菌C. gloeosporioides

拜谱提供数据水平:DIA核蛋白组学

深入分析难点:

学习后果

GP5对炭疽菌的限生产用

通过 菌丝产生传输速率法测定化合物GP4-GP7对菌丝生长的抑制作用,结果显示GP4-GP7的EC50值分别为96.98、27.5、38.48和61.59 mg/L。其中,GP5表现出最强的抑制效果,在12.5 mg/L浓度下,其抑制效果显著优于其他化合物。当GP5浓度为25 mg/L时,对炭疽菌的抑制率接近50%。此外,GP5的抗真菌活性超过了常用的化学农药百菌清和植物源农药苦参碱(图1)。

图1 GP5以及其组成是类似的性无机化合物对球孢梭菌菌丝发展的会影响

(图源:Y. Liu, et al., POSTHARVEST BIOL TEC., 2024)

通过显微镜观察观察,发现在GP5浓度为EC50时,孢子萌发受到明显抑制;而在400 mg/L浓度下,孢子完全不萌发。培养8小时后,GP5处理组的孢子萌发率显著低于对照组。在400 mg/L浓度下,孢子芽管长度仅为11.11 μm,而对照组的芽管长度已达到92.70 μm。这表明GP5能够有效抑制炭疽菌孢子的萌发和芽管伸长(图2)。

图2 用EC50和400mg/L有机废气浓度工作GP5后的孢子长出和芽管长宽高

(图源:Y. Liu, et al., POSTHARVEST BIOL TEC., 2024) 科学研究表明,GP5就可以可行抑止红iPhone、夏黑冬枣和番茄上的炭疽病斑发展。当GP5氧浓度值符合500 mg/L时,红iPhone、夏黑冬枣和番茄的炭疽病死亡率率强势削减。在1000 mg/L氧浓度值下,GP5对红iPhone、夏黑冬枣和番茄的炭疽病都是强势抑止用途(图3)。

图3 GP5可仰制球孢梭菌对采收果种的毒力

(图源:Y. Liu, et al., POSTHARVEST BIOL TEC., 2024)

GP5工作后炭疽菌菌体转化状态

通过扫苗手机体视显微镜(SEM)和散发出电商光学显微镜(TEM)观察,发现GP5处理后的炭疽菌菌丝部分脱水,细胞壁结构发生变化(图4)。在400 mg/L浓度下,GP5处理的菌丝细胞壁粘附增强。TEM观察显示,GP5处理后,细胞内的线粒体结构变得模糊,线粒体嵴断裂,细胞器结构难以辨认,并且出现了自噬体和自溶酶体。这些结果表明,GP5通过诱导自噬导致细胞死亡,从而发挥抗菌作用。

图4 GP5补救后的电镜探究

(图源:Y. Liu, et al., POSTHARVEST BIOL TEC., 2024)

通过荧光显微镜观察,发现GP5处理后的炭疽菌细胞中出现大量红色荧光,表明存在大量的酸性囊泡结构,如自噬体和溶酶体(图5)。这与之前的TEM观察结果一致,证实了GP5诱导的自噬现象。此外,GP5处理后,细胞内钙离子(Ca2+)浓度升高,进一步激活自噬系统。

图5 GP5诊疗后的AO染色的

(图源:Y. Liu, et al., POSTHARVEST BIOL TEC., 2024)

通过JC-1复染法检测线粒体膜电位,发现GP5处理后,线粒体膜电位显著下降。随着GP5浓度的增加,红色荧光逐渐减弱,绿色荧光逐渐增强,表明GP5能够诱导线粒体膜损伤,破坏线粒体功能,进而触发线粒体自噬(图6)。

图6 癌细胞内Ca2+浓度值和线粒体膜电位差变换

(图源:Y. Liu, et al., POSTHARVEST BIOL TEC., 2024)

蛋白质组学讲解

通过DIA氨基酸质组学科技,发现GP5处理后,炭疽菌中有271个蛋白质表达发生显著变化,其中214个上调,57个下调(图7)。GO功能分析显示,差异表达蛋白主要参与代谢过程和细胞过程。KEGG通路分析显示,差异表达蛋白主要富集在有机物质代谢、细胞氮化合物代谢和基因表达等途径。特别是,自噬相关蛋白Atg8的表达上调,进一步证实了GP5通过自噬途径发挥抗真菌作用。

图7 球蛋白组学最终

(图源:Y. Liu, et al., POSTHARVEST BIOL TEC., 2024)

散文总结ppt

研究发现绞股蓝皂苷GP5能够有效抑制炭疽菌的生长和致病性。通过体外实验,GP5显著抑制了炭疽菌菌丝的生长和孢子萌发,其效果优于常用的化学农药氯噻酮和植物源农药苦参碱。进一步的电镜观察和血清组学分析显示,GP5通过激活自噬途径,诱导细胞内自噬体和自溶酶体的形成,从而导致炭疽菌细胞死亡。

图8 GP5打败C. gloeosporioides的抗念珠菌逻辑。

(图源:Y. Liu, et al., POSTHARVEST BIOL TEC., 2024)

拜谱总结ppt

研究采用DIA蛋清组学,揭示了绞股蓝皂苷GP5通过激活自噬机制有效控制炭疽菌的机理。这一发现不仅为防治炭疽病提供了新的思路,还展示了DIA蛋白组学在植物病理学研究中的强大应用潜力。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司,率先引进赛默飞最新一代质谱仪Astral,并且专家团队总结多年DIA蛋白组项目经验,结合Astral质谱仪高稳定性、高灵敏度、高通量、高深度的特性对样品制备、分离技术、算法软件、实验设计全流程进行多维迭代更新,助力蛋白组学检测。此外,拜谱生物还提供转录组学、译文资料后装饰组、分解代谢组学以及几组学联办的产品技术服务,欢迎致电咨询!

借鉴论文:

Liu Y, Li X, Gong C, et al. Gypenoside GP5 effectively controls Colletotrichum gloeosporioides, an anthracnose fungus, by activating autophagy[J]. Postharvest Biology and Technology, 2025, 220: 113305.
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