肉的宰后嫩化首要归因于肌原仟维框架的毁掉，肌原仟维框架是由内源性蛋清酶油脂水解影响酶光降解塑料肌原仟维和受损上皮受损上皮细胞核骨架蛋清酶引起的。与几百年来时不时是瞩目视点的钙蛋清酶酶区别，胱天蛋清酶酶（caspases）近期成为了感需求的情况题。胱天蛋清酶酶在受损上皮受损上皮细胞核凋亡的实行周期起着至关注重的角色，各举caspase-3在人死之后蛋清酶油脂水解影响中的角色是供需双工作方面和错综复杂的，故此直得进两步研发。S-亚硝基化实现自动调钙发出、精力消化吸收、蛋清酶质光降解塑料和受损上皮受损上皮细胞核凋亡来自动调吃起来，也包括嫩度和持水效果。后期研发看见S-亚硝基化能能下跌根据线粒体的caspase-3级联影响，这可以是身体肌肉受损上皮受损上皮细胞核凋亡和鸡肉质量影响的主观原因。caspase-3的研发关键性是其与受损上皮受损上皮细胞核凋亡的的联系，当然，好少有研发探析S-亚硝基化自动调caspase-3的规则。

2024年9月由武汉种植业高校张万刚副教授专业团体在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生物工程为该研究提供了亚硝基化呈现组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

中文名文章标题：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

论文期刊：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2023年关系系数：5.7

发表过日子：2024年9月

用户计量单位：南京农业大学

的研究的原材料：蛋白

拜谱展示技术应用：亚硝基化修饰组学

能力自驾线路：

一、调查最终

01.Caspase-3生物

阶段尚不看不清楚NO对caspase-3的仰拍摄用是否是归因于NO介导的S-亚硝基化，不相同有机废气浓度均值的GSNO当做外源性NO批发商，以介导caspase-3的体内S-亚硝基化。的结果表达，与不会有GSNO的组比较，100、200和400μM GSNO组的caspase-3活力性差异性减小（图1），与之前新闻稿件不一。GSNO处理减小caspase-3活力性的风险主要原因仍欠缺具体分析。

图1 不一样有机废气浓度的GSNO处置对caspase-3活性氧的损害

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化的程度

实验Caspase-3的亚硝基化地步，以阐发GSNO对Caspase-3的反响性。经GSNO整理后，验测到caspase-3淀粉酶S-亚硝基化強度增多（图2）。以上后果表示，外源性GSNO培养出可取得成功引诱caspase-3的身体外S-亚硝基化。最令 惊呆的是，在没GSNO会出现的照表组中验测到一名暗淡的S-亚硝基化带，这表示caspase-3很有可能发生内源性的S-亚硝基化。因此，本实验中caspase-3的S-亚硝基化地步较高，而caspase-3的特异形减低，这与过后的实验保持一致。殊不知，caspase-3的特异形S-亚硝基化掩盖位点尚不了解清楚，还可以进步骤的不断探索。

图2 GSNO治疗对caspase-3S-亚硝基化的水平的危害

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化修饰语组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的编码字段。黄色标识符号的编码字段表达出来S-亚硝基化肽，橙红色标识符号的C表达出来S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱图

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3可降解结球蛋白

结蛋清算作属于关键的肿瘤细胞膜骨架蛋清，在长期保持肌肿瘤细胞膜构造特征的构造特征完全性和内缩性方便起着关键帮助，设计S-亚硝基化caspase-3对结蛋清化学分解的灵敏性体现了关键有何意义。与Std（未用胱天蛋清酶-3和GSNO孵育的默认值肌氯纶蛋清）组不同于，0 μM GSNO组（肌原氯纶和caspase-3的孵育，无GSNO）的完全结蛋清含磷量同质性影响，显示信息caspase-3对结蛋清体现了隐藏的的蛋清淀粉水解特性。在GSNO孵育后，完全结蛋清的含磷量清晰扩大（P < 0.05）。除此之外，当GSNO氨水浓度增大时，完全结蛋清的含磷量继续上浮（P < 0.05）（图5）。某些看到反映出，SNO修饰语的caspase-3以水平方向依赖感的模式减缓结蛋清的化学分解。

图5.S-亚硝基化caspase-3吸附结淀粉酶

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3降解塑料肌钙蛋白质-T

肌钙血清-T (TnT)是原肌球血清调理否则胸肌紧缩的丝条的有必须肌原弹性仟维板血清。TnT的可溶解结构特征是监测到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化的条件下，caspase-3对TnT的可溶解条件如同6如图所示，与Std组（不标caspase-3和GSNO的肌原弹性仟维板）相信，caspase-3组中30 kDa TnT情节相关性添加，是因为caspase-3直接参与了TnT的可溶解，前者，caspase-3与GSNO的孵育引致30 kDa TnT减退。在100和200 μM GSNO组当中如果没有监测到特别的性别差异(P > 0.05)，而当GSNO的溶度实现400 μM 时，该情节相关性下降(P < 0.05)。这么多得知是因为了SNO突显的caspase-3对TnT可溶解的减弱的作用。结血清和TnT是caspase-3的神经敏感底物，而GSNO解决降低caspase-3的灵可溶性有可能引致肌原弹性仟维板血清可溶解情况降低。综上提出的提出的，NO引诱的S-亚硝基化可不可以依据突显半胱氨酸残基来调理caspase-3的灵可溶性，随之进一大步影晌其对结血清和TnT的血清电离性能，最后影晌牛羊肉品质保证。

图6. S-亚硝基化caspase- 3可降解肌钙淀粉酶-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、总结ppt

本探析指在研究方案S-亚硝基化对caspase-3绘制的直接引响和其继而对羊肉肌原棉仟维休外化学降解的直接引响。核核蛋白质S-亚硝基化应该绘制caspase-3的半胱氨酸残基，为了出现caspase-3活力性拉低，进一大步抑制性了其对羊肉肌原棉仟维核核蛋白质的核核蛋白质淀粉水解力。

三、拜谱个人总结

调查按照了酶活法测，亚硝基化遮盖组学剖析，WB等验测方法手段，发现了核球脂肪酸质S-亚硝基化需要遮盖caspase-3的半胱氨酸残基，这从而导致了caspase-3活力的降底，齐头并进这一步限制了其对羊肉肌原纤维材料核球脂肪酸质的核球脂肪酸质淀粉水解性能。本调查为描述核球脂肪酸质质亚硝基化对色泽的调空考核机制作为一个多个新的第一人称。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的血清质组学、表达血清质组学、消化吸收组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸全系列食品，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺过酸、total空气氧化完美重现、氧化钙含量巯基，欢迎大家咨询！

符合资料：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663